马铃薯的种植技术，附组织培养步骤

一、马铃薯的种植技术

1、选择种薯

种植马铃薯时，要挑选品种优良的种薯，一般选择表皮鲜艳且健康无畸形的马铃薯，再对其进行催芽处理。

2、催芽处理

催芽处理是马铃薯种植技术中的关键，主要将选取的种子放在湿润且厚度在10cm左右的沙土中，将种子平放在里面，在上面覆盖一层5cm厚度的过筛沙土，用喷水壶进行浇水，保持土壤湿润状态，温度保持在20℃左右即可。

3、科学整地

（1）栽种前需要将土壤进行消毒，消毒方法为喷洒稀薄的硫酸铜或者草木灰溶液，以防止病菌的滋生。

（2）基质应以疏松肥力足且富含有机质的土壤为主，马铃薯不适合连作，易发生病害，可在浇入有机肥后进行松土。

4、入栽定植

（1）栽种前需要在土表埋入少量稀薄的有机肥肥粒，以加快根系的生长。

（2）一般早熟的种苗间距需保持在20公分左右，中熟品种的则在25公分左右，栽后覆盖一层6-10cm左右的细土，浇入水分后保湿，进行深耕处理。

5、栽后管理

（1）如气温较低，需要在土壤上覆盖一层地膜，以免植株冻伤。

（2）在生长期间需控制温度在16℃-20℃左右，3月时可以打开地膜，利于通风，长势好的时候可追施1-2次的磷酸二氢钾，保持土壤湿润。

二、马铃薯的组织培养步骤

1、什么是马铃薯的组织培养

（1）马铃薯的组织培养是指，通过无菌操作分离马铃薯体的一部分（外植体explant），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。

（2）主要有原生质体（Protoplast），悬浮细胞，组织（愈伤组织Callus、茎尖分生组织），器官（胚，花药，子房，根和茎的培养）。其中最常见的是愈伤组织培养。

2、马铃薯组织培养的具体步骤

（1）表面灭菌

①冲洗马铃薯材料除去泥土等大的颗粒。

②浸入70-75％乙醇，有利于马铃薯表面的浸湿。

③用5-20％NaClO溶液（加1滴表面活性剂）表面消毒5-10min。

④用无菌水冲洗至少3遍。

⑤与消毒剂接触过的切面在转移到无菌培养基前应切去，因为消毒剂会杀死外露的细胞从而影响营养吸收。

⑥切取外植体，通常为10mm的茎段和直径10mm的叶片部分（太大激素作用减弱，太小则不易成活）。

（2）培养基

①培养基是植物组织生长的物质基础，因此其组成和理化性质都非常重要。

②在离体条件下，植物激素对马铃薯茎段愈伤组织的诱导、分化起着重要作用。

③马铃薯离体组织培养常用的激素有：生长素如2,4-D、IAA、NAA，细胞分裂素如KT、6-BA，还有赤霉素。

④实验中应该根据研究目的选择合适的激素配比，各种激素均有其最适浓度，过高或过低都会影响植株成愈和分化。

⑤培养基的pH值也有重要影响，pH值影响培养基凝固程度和材料吸收营养。培养基渗透压50.7-202.7kPa适合于植物组织生长，太高会抑制其生长和分化。

（3）愈伤组织培养脱毒

①通过植物器官和组织的培养，分化诱导产生愈伤组织，愈伤组织再分化产生芽，长成小植株，可以得到无病毒苗（因为在受感染植株的组织脱分化形成愈伤组织中，细胞不携带病毒或细胞不含病毒）。

③试验表明，愈伤组织培养脱除病毒的效果比茎尖培养成功率高，但愈伤组织培养所产生的植株遗传性状不稳定，在生产中要注意该问题。

（4）环境因素

①光照

马铃薯不同外植体对光暗要求不同。黑暗有助于提高块茎和茎段出愈率，光照可以增加马铃薯茎尖、叶片出愈率和出愈速度。 

②温度

温度影响器官发生的数量和质量。大多数植物在（25±2）℃生长良好。植物组织培养中，一般都采用22-25℃的恒温条件进行外植体培养，马铃薯组织培养过程均在这个温度范围内进行。

③湿度

环境湿度过大会引起霉菌污染，湿度过低虽不会直接影响培养容器内的湿度，但当培养过久或温度过高时培养基会变干，改变培养基各组分的浓度，影响组织正常生长，应及时转接以保证试管苗的水分和营养供应，相对湿度最好保持在70%-80%。

④气体

培养容器内的气体成分影响培养物的生长和分化。若培养容器通透性太好，水分易散失。通透性太差，瓶中产生的有害气体不易扩散。当培养基中氧浓度低于临界水平时，利于形成胚状体，反之，则利于形成根。